等温扩散
“环介导等温扩散技术(LAMP)是一种独特的技术,能在等温的条件下,快速扩散简单的DNA,并提供易于阅读的可视化显示,该技术非常强大,且能广泛用于医疗机构。”
——世卫组织政策指南,使用TB-LAMP诊断肺结核,2016年8月
环介导等温扩散(LAMP)可用于扩散确定序列的基因,并可用于检测任何病原体。它能在相同温度下进行扩散,并且相比于传统PCR技术更快速、更具体检测目标DNA。LAMP与实时PCR类似,测试信号产生在循环过程发生中间或直接在循环过程之后发生。通过读取绿色荧光的荧光值或通过实时测量浊度,从而可视化地检测扩增产物。
> 整个工作流程仅包含四个主要步骤:
> 样品的转移和裂解
> 纯DNA的提取或加热、离心
> 环介导等温扩散
通过目视或测量浊度读取结果
LAMP的稳定、高灵敏度和简易操作使LAMP成为一种优良的,且不易出错的解决方案。HUMAN提供LAMP检测系统,用于筛查结核分枝杆菌复合群(MTBC)以及疟疾细菌感染。
“我们需要新的检测方法来快速诊断患有结核病的人群,更早、更安全、更简易、更短疗程,以及有效的新疫苗,是我们现在所需要的。”
——联合国秘书长潘基文,2016年3月24日,世界结核病日
涂片显微镜检查几乎每一秒都会发生阳性结核病例的误诊
TB-LAMP技术稳定,且操作简便
环介导等温扩散技术的工作流程,可以在非常短的步骤内实现DNA反应混合物的提取,且不需要任何额外的设备。室温下的试剂储存和运输,及出色的测试性能,即使在偏远地区也可以进行病原体检测。
> 高度的特异性、敏感性
> 极短的周期即可完成
> 处理过程简单
> 检测结果十分稳定,可重复性高
> 结果直观,通过目视或者浊度计即可观察结果
世卫组织建议,用TB-LAMP替代现有的涂片镜检方法
> TB-LAMP能检测出15%以上的阳性结核病例
> 在涂片镜检阴性的情况下,也能准确检测结核病例
> 当GeneXpert系统不可用时,可作为所有患者的首要测试
能可靠的发现疟疾
“疟疾的检测和治疗的研究,需要开发出更容易检测无症状疟疾携带者体内的低水平寄生虫症的工具,并确保不同筛查策略在较高传播水平地区的有效性,以便适当地进行干预和治疗。”
——世界卫生组织,全球疟疾技术战略(2016-2030),2015
显微镜和RDT的方法,无法在低渗透条件下识别出寄生虫
简单快速的疟疾-LAMP工作流程
环介导等温扩散技术的工作流程,可以在非常短的步骤内实现DNA反应混合物的提取,且不需要任何额外的设备。室温下的试剂储存和运输,及出色的测试性能,即使在偏远地区也可以进行病原体检测。
> 高度的特异性、敏感性
> 极短的周期即可完成
> 处理过程简单
> 检测结果十分稳定,可重复性高
> 结果直观,通过目视或者浊度计即可观察结果
性能极佳,能确保极高的可靠性
> 灵敏度96-100%,特异性97-100%
> 检测限达到1μL单个寄生虫
> 能鉴别疟原虫泛种和恶性疟原虫
> 被列入世卫组织关于低传播环境下疟疾诊断的政策简报
@2018 HUMAN China